一、指導(dǎo)思想
《DNA的粗提取與鑒定》實(shí)驗(yàn)是“遺傳和變異”一章的重點(diǎn),DNA是生物工程中研究的焦點(diǎn),所以通過實(shí)驗(yàn),讓學(xué)生對(duì)DNA的粗提取與鑒定有親身的體驗(yàn),形成初步的感性認(rèn)識(shí)是很有必要的。然而,實(shí)驗(yàn)所需的試劑器材多,實(shí)驗(yàn)員準(zhǔn)備時(shí)間長(zhǎng)(如雞血的取得及處理),學(xué)生操作步驟多,持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)(一般需要一節(jié)多課),如果僅僅遵循實(shí)驗(yàn)步驟提取并鑒定DNA,掌握怎樣做,雖然能夠培養(yǎng)學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作技能,但不能充分體現(xiàn)新課標(biāo)理念和高考改革的方向,與我校學(xué)生文化素質(zhì)的基本情況也不相符,因而不能充分利用這次難得的實(shí)驗(yàn)機(jī)會(huì)。
我們知道,新課標(biāo)倡導(dǎo)探究性學(xué)習(xí),力圖促進(jìn)學(xué)生學(xué)習(xí)方式的變革,引導(dǎo)學(xué)生主動(dòng)參與探究過程,勤于動(dòng)手和動(dòng)腦,逐步培養(yǎng)學(xué)生收集和處理科學(xué)信息的能力,獲取新知識(shí)的能力、批判性思維的能力、分析和解決問題的能力,以及交流與合作能力等,重在培養(yǎng)創(chuàng)新精神和實(shí)踐能力。為此,新課標(biāo)在設(shè)計(jì)的6個(gè)模塊中共建議安排68個(gè)探究性的實(shí)驗(yàn)和實(shí)習(xí)活動(dòng),這比現(xiàn)行教學(xué)大綱中安排的多出40個(gè)。新課標(biāo)強(qiáng)調(diào)的探究性學(xué)習(xí)突出地體現(xiàn)在每一個(gè)精心設(shè)計(jì)的學(xué)生活動(dòng)中,即使是簡(jiǎn)單的驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)也是在發(fā)現(xiàn)問題、提出假設(shè)、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)、完成實(shí)驗(yàn)以及得出結(jié)論的探究過程中進(jìn)行的。在能力教學(xué)目標(biāo)中將發(fā)展學(xué)生的探究能力非常具體的規(guī)定為11方面如:分析問題,闡明與研究該問題的相關(guān)知識(shí)、設(shè)計(jì)可行的實(shí)驗(yàn)方案、實(shí)施實(shí)驗(yàn)方案,收集證據(jù)、聽取他人的意見,利用證據(jù)和邏輯對(duì)自己的結(jié)論進(jìn)行辯護(hù)以及作必要的反思和修改等。科學(xué)探究強(qiáng)調(diào):知識(shí)的獲得固然重要,掌握知識(shí)如何獲得的過程更為重要。
從高考改革來看,高考強(qiáng)調(diào)知識(shí)、能力、方法,重視科學(xué)素養(yǎng)的考察,這與新課程理念是一致的。以今年江蘇高考為例,新課程理念體現(xiàn)的十分明顯:1、加強(qiáng)了對(duì)實(shí)驗(yàn)?zāi)芰涂茖W(xué)探究能力的考查。試卷中共有10題屬于實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,但考查的側(cè)重點(diǎn)不同,有考原理、過程、裝置、研究過程、錯(cuò)誤分析等。另外,研究性學(xué)習(xí)內(nèi)容考查也有所突出。側(cè)重從研究性學(xué)習(xí)的方法、研究性學(xué)習(xí)內(nèi)容的拓展、延伸與應(yīng)用進(jìn)行了考查。這些研究性學(xué)習(xí)內(nèi)容在一份高考試題中體現(xiàn)出來,是新課標(biāo)中關(guān)于研究性學(xué)習(xí)的具體體現(xiàn)。2、注重識(shí)圖表、繪圖表能力的考查。整套試卷出現(xiàn)了表示實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、生物學(xué)現(xiàn)象、坐標(biāo)曲線圖等各種圖形24個(gè)。另外,還有7個(gè)表格,這些圖表的使用,包含了大量的解題信息,考生要從大量圖形或曲線中獲取信息,加大了思維容量,是對(duì)學(xué)生能力考查的重要體現(xiàn)。3、聯(lián)系江蘇實(shí)際,注重?zé)狳c(diǎn)問題 ?傊诳疾閷W(xué)生對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)和基本技能掌握程度的同時(shí),進(jìn)一步加強(qiáng)了對(duì)獲取信息、探究、批判思維、綜合運(yùn)用等能力的考查,實(shí)驗(yàn)比重大,強(qiáng)調(diào)了研究性學(xué)習(xí)的考查。我覺得我們今年的試題在重視基礎(chǔ)知識(shí)的同時(shí),加強(qiáng)了對(duì)學(xué)生科學(xué)思維方式和實(shí)驗(yàn)技能的考察,將來會(huì)不會(huì)朝課改區(qū)的方向進(jìn)一步的發(fā)展,值得引起我們的關(guān)注。
我們的學(xué)生,文化綜合素質(zhì)較差,這決定了學(xué)生連基礎(chǔ)知識(shí)的落實(shí)都存在很大問題,談能力的培養(yǎng)就更加困難。(如不少學(xué)生課堂自我控制和配合能力低,自主學(xué)習(xí)不專心,實(shí)驗(yàn)中學(xué)生哄鬧、嬉笑、難以平息下來等情況時(shí)常出現(xiàn);學(xué)生基礎(chǔ)較差,理解原理都困難,對(duì)于探究什么、如何進(jìn)行探究更是十分茫然;學(xué)生表達(dá)交流能力弱,小組間學(xué)習(xí)交流效果差等),但高考的標(biāo)高是不會(huì)降低的,我們必需改變教學(xué)方式,通過引導(dǎo),幫助學(xué)生落實(shí)基本知識(shí),幫助他們嘗試設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),培養(yǎng)他們一定的科學(xué)文化素養(yǎng)。
有了上面一些想法,我想將這一驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)改為探究性實(shí)驗(yàn),通過動(dòng)腦動(dòng)手,鞏固落實(shí)課本基本知識(shí),同時(shí)培養(yǎng)學(xué)生一定的創(chuàng)新意識(shí)。
二、教學(xué)思路
依據(jù)新課標(biāo)倡導(dǎo)探究性學(xué)習(xí)的理念以及高考試題的發(fā)展方向,結(jié)合我校學(xué)生的實(shí)際情況,將本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)為探究性實(shí)驗(yàn)。力求引導(dǎo)學(xué)生主動(dòng)參與實(shí)驗(yàn)的探究過程,激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)熱情,幫助學(xué)生以感性認(rèn)識(shí)為基礎(chǔ),深入理解、體會(huì)科學(xué)探究的一般步驟。具體來說,教師在教學(xué)中重點(diǎn)注重引導(dǎo)學(xué)生分析實(shí)驗(yàn)原理,借助實(shí)驗(yàn)落實(shí)鞏固課本基礎(chǔ)知識(shí),在具體的操作中,開放實(shí)驗(yàn)材料的選擇、實(shí)驗(yàn)過程的設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的鑒定方法,教師只起組織、指導(dǎo)甚至與學(xué)生合作的作用,嘗試培養(yǎng)學(xué)生利用基礎(chǔ)知識(shí)解決實(shí)際問題的能力。學(xué)生在充分理解實(shí)驗(yàn)原理的基礎(chǔ)上,自選實(shí)驗(yàn)材料,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟,觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果,教師鼓勵(lì)學(xué)生大膽提出問題、作出假設(shè)、科學(xué)實(shí)驗(yàn)、分析結(jié)果,初步培養(yǎng)學(xué)生開展探究性實(shí)驗(yàn)的信心和科學(xué)素養(yǎng)。
三、教材處理
補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)原理1、雞血細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)材料,一是因?yàn)殡u血(尤其是雄雞)細(xì)胞核的DNA含量豐富,材料易得;二是雞血細(xì)胞極易吸水脹破。2、在濃度較高的氯化鈉溶液(物質(zhì)的量濃度為2 moL/L )中,核蛋白容易解聚,游離出DNA。而DNA在濃度較高的氯化鈉溶液中的溶解度很高,Na+與帶負(fù)電的DNA結(jié)合成DNA鈉鹽。這時(shí)DNA在溶液中呈溶解狀態(tài);3、DNA在濃度較低的氯化鈉溶液中溶解度小,而蛋白質(zhì)的溶解度增高(這就是蛋白質(zhì)的鹽溶現(xiàn)象);4、預(yù)冷的乙醇溶液具有以下優(yōu)點(diǎn):一是抑制核酸水解酶活性,防止DNA降解,二是降低分子運(yùn)動(dòng),易于形成沉淀析出,三是低溫有利于增加DNA分子柔韌性,減少斷裂;5、洗滌劑等去污劑可以溶解細(xì)胞的細(xì)胞壁,破壞細(xì)胞膜,同時(shí)也能使蛋白質(zhì)變性;6、DNA和蛋白質(zhì)對(duì)高溫耐受性的不同;7、甲基綠能使DNA染成綠色
補(bǔ)充材料 花椰菜 蘿卜 洋蔥 月季花葉
洗潔精 研磨液 甲基綠
四、教學(xué)目標(biāo)設(shè)計(jì)
知識(shí)目標(biāo)
1、通過嘗試對(duì)植物或動(dòng)物組織中的DNA進(jìn)行粗提取,了解DNA的物理化學(xué)性質(zhì)。
2、理解DNA粗提取與鑒定的原理。
能力目標(biāo)
掌握DNA粗提取及鑒定方法,能利用DNA的性質(zhì)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和操作。
態(tài)度觀念目標(biāo)
通過對(duì)DNA的粗提取的實(shí)驗(yàn)過程的設(shè)計(jì)及操作,鍛煉科學(xué)的思維方法,培養(yǎng)實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度。
五 教學(xué)重難點(diǎn)
重點(diǎn) 實(shí)驗(yàn)原理的分析及材料的選擇
難點(diǎn) 實(shí)驗(yàn)步驟的設(shè)計(jì)及操作
六 課時(shí)安排
2課時(shí)
七、教學(xué)方法
設(shè)疑分析-----引導(dǎo)探究-------交流討論的發(fā)現(xiàn)法教學(xué)
八、教學(xué)過程設(shè)計(jì)
要提取DNA并鑒定提取物是DNA,要解決的主要問題有:①DNA主要存在于細(xì)胞核中,如何選取具核的生物組織作為實(shí)驗(yàn)材料。②如何除去核膜和細(xì)胞膜,對(duì)于植物細(xì)胞又如何破壁。③細(xì)胞核中除DNA外,還有其他一些大分子物質(zhì),且DNA以核蛋白體的形式存在。那么,如何使DNA與蛋白質(zhì)等其他的大分子物質(zhì)分開。④如何去除雜質(zhì)使DNA更加純化。⑤如何驗(yàn)證提取物主要是DNA成分。我們教學(xué)的重點(diǎn)就是要以這些主要問題為引子,引導(dǎo)學(xué)生在思考這些問題的同時(shí),鞏固基礎(chǔ)知識(shí),利用這些知識(shí),設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟。
(一)引入新課 以艾弗里研究DNA是遺傳物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)引入,提出問題:艾弗里實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的關(guān)鍵思路是什么?過渡到我們今天也嘗試著對(duì)DNA進(jìn)行粗提取并鑒定。
(二)進(jìn)行新課
1.原理分析
提取生物大分子的基本思路是選用一定的物理或化學(xué)方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。細(xì)胞中有那些大分子物質(zhì)?哪種大分子在細(xì)胞中含量最大?(鞏固組成細(xì)胞的元素及其化合物)
1.1如何除去其他成分,提取DNA?
資料分析 ①DNA在NaCl溶液中的溶解曲線 ②蛋白質(zhì)的鹽溶和鹽析現(xiàn)象:在蛋白質(zhì)水溶液中,加入少量低濃度的中性鹽,如硫酸銨、硫酸鈉、氯化鈉等,蛋白質(zhì)在水溶液中的溶解度增大,這種現(xiàn)象稱為鹽溶,如雞蛋清的溶解。而蛋白質(zhì)在高濃度的鹽溶液中,蛋白質(zhì)析出,這種現(xiàn)象稱為“鹽析”。③酒精對(duì)DNA和蛋白質(zhì)的不同作用
提出問題:
①DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度有何特點(diǎn)?要使DNA溶解,需要使用什么濃度?要使DNA析出,又需要使用什么濃度?
②如何操作,使DNA在鹽溶液中溶解或析出?
③DNA越純,鑒定時(shí)效果越明顯,進(jìn)一步提出問題 利用所學(xué)的知識(shí),還有哪些方法可以將DNA和蛋白質(zhì)分開,進(jìn)一步提純DNA?引導(dǎo)學(xué)生從酶和溫度來思考。(應(yīng)選用什么酶?蛋白酶,因?yàn)槊妇哂袑R恍。溫度值?SPAN lang=EN-US>60~
歸納小結(jié),形成提取和純化DNA的方案:
方案一:30mL含DNA的濾液+2mol/L NaCl→同方向攪拌,DNA溶解→加入蒸餾水→DNA析出→過濾得到過濾物→放到2mol/LNaCl溶液中溶解→DNA-NaCl溶解液
方案二:30mL濾液+嫩肉粉(木瓜蛋白酶)→靜置10~15分鐘→DNA濾液
方案三:30mL濾液→60~75℃恒溫保溫10~15分鐘→過濾獲得DNA濾液
1.2如何讓細(xì)胞中DNA釋放到鹽溶液中?
提出問題 DNA在細(xì)胞中存在部位?能否通過生物膜從細(xì)胞中出來?如何破碎細(xì)胞?(鞏固細(xì)胞的結(jié)構(gòu),細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu),物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的方式)(方法:研磨、酶解、洗潔精瓦解細(xì)胞膜等)
1.3如何鑒定DNA?
當(dāng)鑒定提取出的物質(zhì)是否是DNA時(shí),需要使用什么指示劑進(jìn)行鑒定?如何鑒定提取出的DNA是否還含有其他一些雜質(zhì),如還原性糖類、脂肪、蛋白質(zhì)等?要想說明顏色變化是DNA引起的,而不是所含蛋白質(zhì)這一雜質(zhì)引起,怎樣操作?(鞏固前面的實(shí)驗(yàn),培養(yǎng)設(shè)計(jì)對(duì)照的思想)
原理小結(jié):通過利用不同濃度NaCl溶液溶解或析出DNA,可以從細(xì)胞中提取和提純DNA;再利用酒精進(jìn)一步將DNA與蛋白質(zhì)分離開來,達(dá)到提純的目的;最后利用二苯胺試劑鑒定提取的物質(zhì)是否是DNA。
2.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
通過原理分析,我們可將實(shí)驗(yàn)步驟歸納為 ①釋放組織細(xì)胞中的DNA,②粗提取DNA,③將粗提取的DNA進(jìn)一步純化,④鑒定提取物是DNA
2.1實(shí)驗(yàn)材料
理論上,凡是含有DNA的生物材料都可以考慮。
2.2破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液
若選用雞血和洋蔥作實(shí)驗(yàn)材料,則怎樣獲取含DNA的濾液?(引導(dǎo)學(xué)生利用所掌握的知識(shí)設(shè)計(jì)操作步驟)(在雞血細(xì)胞液中加入一定量蒸餾水并用玻棒攪拌,過濾后收集濾液;切碎洋蔥,加入一定量洗滌劑和食鹽,攪拌研磨,過濾后收集濾液。)
在以上實(shí)驗(yàn)中,加入蒸餾水、洗滌劑和食鹽的作用分別是什么?過濾時(shí)應(yīng)當(dāng)選用濾紙、還是尼龍布?
(血細(xì)胞在蒸餾水中大量吸水而脹破;洗滌劑瓦解細(xì)胞膜;食鹽溶解DNA物質(zhì);選用尼龍布進(jìn)行過濾。)
在處理植物組織時(shí)需要進(jìn)行研磨,其目的是什么?研磨不充分產(chǎn)生什么結(jié)果?
(破碎細(xì)胞壁,使核物質(zhì)容易溶解在NaCl溶液中;研磨不充分會(huì)使DNA的提取量減少。)
(具體做法:10mL雞血+20mL蒸餾水→同方向攪拌→3層尼龍布過濾→濾液)
2.3除去濾液中的雜質(zhì):最初獲得的DNA濾液含有蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等雜質(zhì),需要進(jìn)一步提純DNA。根據(jù)三種方案提取并純化DNA。
2.4DNA析出與鑒定 在濾液中仍然含有一些雜質(zhì),怎樣除去這些雜質(zhì)呢?得到的DNA呈何顏色?(濾液與等體積的冷卻酒精混合均勻,靜置2~3分鐘,析出的白色絲狀物就是DNA。DNA呈白色。)
怎樣鑒定析出的白色絲狀物就是DNA呢?簡(jiǎn)述DNA的鑒定過程。
(具體做法。試管2支,編號(hào)甲乙→各加等量5mLNaCl溶液→甲中放入少量白色絲狀物,使之溶解→各加4mL二苯胺,混合均勻→沸水浴5min→觀察顏色變化)
3.實(shí)驗(yàn)操作 學(xué)生根據(jù)教師的引導(dǎo),通過小組討論,設(shè)計(jì)好操作步驟,選擇自己喜歡的實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。教師巡視并參與學(xué)生的實(shí)驗(yàn),起組織、指導(dǎo)、合作、促進(jìn)作用。
附:幾種不同材料的操作過程
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雞血細(xì)胞 |
植物組織 |
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1.配質(zhì)量濃度為 2.將血液置于冰箱中24小時(shí),棄上部澄清液 3.取燒杯中的血細(xì)胞液約5~10ml加入到100ml燒杯中,向燒杯中加入20ml蒸餾水,用玻棒沿一個(gè)方向快速攪拌5分鐘,加速血細(xì)胞在低滲溶液中的破裂 4.將 5.將雞血細(xì)胞DNA提取液置于較大的燒杯中,沿?zé)瓋?nèi)壁緩緩倒入蒸餾水,并不斷攪拌,直到粘稠狀DNA不再析出為止。用玻棒攪拌,使析出的DNA纏繞于玻棒末端。為減少DNA的損失,可省略教材上要求的用紗布過濾這一步驟。 6.將析出的DNA再溶解于 7.在DNA的氯化鈉溶液中倒入95%的酒精50 ml(冷卻過的酒精效果較好),使DNA再次析出,用玻棒攪拌,使DNA再次纏繞于玻棒末端。 8.DNA的鑒定:取兩支試管,各加入2ml0.015氯化鈉溶液,將DNA溶解于其中一支試管中,另一支做為對(duì)照組。然后,在兩支試管內(nèi)加入相同的量的二苯胺試劑,水浴加熱10min左右,冷卻,觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。 |
1.取新鮮植物組織(菜花)放置于冰箱中冷卻1~2天 2.取 3.過濾研磨液,取上清夜置于冰箱中冷卻幾分鐘 4.取1倍體積的上清液,加入2倍體積的95%的冷酒精當(dāng)中,用玻棒輕輕攪拌,沉淀3~5分鐘后可見白色絮狀DNA纏繞于玻棒末端。 5.DNA的提純同雞血細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料的實(shí)驗(yàn)操作步驟6、7,具體數(shù)據(jù)有一定的差異。 6.鑒定(略) |
其它注意事項(xiàng):在雞血中加入檸檬酸鈉防止凝固;雞血靜置以提高細(xì)胞懸液濃度;使用塑料燒杯;使用尼龍布過濾;玻棒沿同一方向攪拌;玻棒攪拌要緩慢(細(xì)胞破裂快速攪拌);玻棒不要碰到燒杯壁;二苯胺試劑要現(xiàn)用現(xiàn)配等。為了提高DNA純度,在科學(xué)實(shí)驗(yàn)中通常使用的洗滌劑有十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)、十二烷基硫酸鈉(SDS)。
九、教學(xué)中可能出現(xiàn)的問題及對(duì)策
實(shí)驗(yàn)改為探究性實(shí)驗(yàn)后,對(duì)學(xué)生的能力要求很高,可能出現(xiàn)的主要問題有:1 學(xué)生是否能夠在教師的引導(dǎo)下,順利回答出實(shí)驗(yàn)中涉及到的一些基本知識(shí)?2 學(xué)生是否能理解實(shí)驗(yàn)原理,利用所學(xué)的知識(shí),設(shè)計(jì)出可操作的實(shí)驗(yàn)步驟?
對(duì)于問題1,我準(zhǔn)備將涉及到的相關(guān)知識(shí)、圖片做成幻燈片,如果學(xué)生回憶不起來,就將相應(yīng)知識(shí)呈現(xiàn)給學(xué)生,通過復(fù)習(xí),使學(xué)生的知識(shí)得到鞏固;對(duì)于問題2,我想根據(jù)學(xué)生素質(zhì)的不同,在引導(dǎo)中區(qū)別對(duì)待,學(xué)生素質(zhì)如果較高,操作步驟只作提示,如果較低,則象上面教學(xué)設(shè)計(jì)一樣,給出具體的方案。
十、備課中需要大家?guī)椭膯栴}
1 將教學(xué)重點(diǎn)定位在鞏固落實(shí)基本知識(shí),并且新課中有復(fù)習(xí)課的味道,實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和操作技能的培養(yǎng)突出的不是很充分,是否恰當(dāng)?
2 如何組織語(yǔ)言,使各教學(xué)環(huán)節(jié)流暢、自然,達(dá)到較好的教學(xué)效果?
3 為確保得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果,學(xué)生的設(shè)計(jì)方案要不要在全班共同討論?
4 如果學(xué)生的方案有多種,如何組織實(shí)驗(yàn)順利、有序的實(shí)施?